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#Novedades de la industria
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¿Cuánto sabe sobre la aplicación de las perlas magnéticas?
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¿Cuánto sabe sobre la aplicación de las perlas magnéticas?
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Basado en la tecnología SPRI, en el sistema de reacción del método de perlas magnéticas, las moléculas de ácido nucleico (ADN y ARN) se comprimirán de forma lineal a esférica. El ADN sufrirá cambios drásticos en su conformación molecular promovidos por el NaCl o el MgCl2 en presencia de cierta concentración de PEG. Un gran número de grupos de fosfato cargados negativamente en la columna vertebral del fosfato se unirán a las perlas magnéticas de carboxilo cargadas negativamente en la superficie. Actualmente se piensa que esta interacción entre cargas negativas y negativas se debe a la acción de los iones salinos cargados positivamente (por ejemplo, Na+). El grupo fosfato cargado negativamente forma una estructura de puente salino "anión-catión-anión" con el grupo carboxilo a través del ion salino disociado (por ejemplo, Na+), de modo que el ADN se adsorbe específicamente a la superficie de las perlas de carboxilo. Cuando se desecha el tampón de reacción, la adición de una molécula de agua hidrata rápida y completamente las moléculas de ácido nucleico y libera la interacción iónica entre los tres, permitiendo la purificación de las moléculas de ácido nucleico adsorbidas a las perlas magnéticas. Utilizando las propiedades magnéticas de las perlas magnéticas, los fragmentos de ADN pueden ser recogidos y eluidos mediante un campo magnético aplicado.
Gracias al desarrollo de la tecnología de secuenciación de alto rendimiento, las perlas magnéticas también son muy apreciadas por su alto rendimiento y su aplicabilidad a la automatización. Además, las perlas magnéticas se utilizan ampliamente para la purificación del ADN y la selección del tamaño de la doble vuelta (cribado de fragmentos) en la preparación de bibliotecas de secuenciación de próxima generación (NGS).
El objetivo de la purificación del ADN es eliminar los fragmentos no deseados y recuperar los fragmentos necesarios. Por lo tanto, hay que descartar el sobrenadante y conservar las perlas magnéticas, y luego lavar y eluir. Dado que las perlas absorben preferentemente los fragmentos grandes, se puede utilizar un cierto porcentaje de perlas para atraer fragmentos de ADN por encima de un determinado tamaño. El sobrenadante (fragmentos de ADN no objetivo) se desecha y las perlas se eluyen para recuperar el ADN absorbido.
El propósito de la selección del tamaño de la doble ronda de ADN (cribado de fragmentos) es seleccionar fragmentos de ADN de un tamaño específico. Dado que las microesferas adsorben preferentemente fragmentos grandes, la selección de tamaño se realiza mediante dos rondas de manipulación de las microesferas.
Perlas magnéticas BunnyMagTM
Las microesferas magnéticas de Purificación y Selección de Tamaño de ADN BunnyMagTM desarrolladas por BunnyTeeth Inc. son similares a la mayoría de las microesferas magnéticas del mercado
Estructura de las perlas magnéticas BunnyMagTM(3 capas):
El núcleo interior es de poliestireno (PS)
La segunda capa está envuelta con material magnético--Fe3O4
La superficie más externa es un polímero modificado por grupos carboxilo(-COOH)
Composición principal: Perlas superparamagnéticas、Polietilenglicol(PEG)、NaCl
Ventajas de las perlas magnéticas BunnyMagTM
(1) Bajo requerimiento de muestra: se puede extraer una alta concentración de ácidos nucleicos a partir de una cantidad mínima de material.
(2) Operación simple y rápida: todo el proceso de operación se divide básicamente en cinco pasos (lisis, unión, lavado, secado, elución), y todo el proceso puede completarse en 30-60 minutos sin operación de centrifugado en su mayoría.
(3) Calidad estable y fiable: las perlas magnéticas libres absorben más ácidos nucleicos, y la unión específica hace que la pureza del ácido nucleico sea mayor, y la recuperación del ácido nucleico puede ajustarse controlando los grupos de superficie de las perlas magnéticas.
(4) Operación totalmente automatizada: el extractor de ácido nucleico puede ser utilizado para lograr una operación automatizada y de alto rendimiento, y realizar la extracción de docenas o incluso cientos de muestras.
(5) Seguro, no tóxico e inofensivo: los reactivos no contienen fenol, cloroformo y otros reactivos químicos tóxicos, lo que cumple plenamente con el concepto moderno de protección del medio ambiente.