Aplicación de criostato como equipo de histología en experimentos inmunohistoquímicos

Un criostato de calidad es el equipo histológico clave para llevar a cabo experimentos inmunohistoquímicos de alta precisión, fáciles de usar y fluidos.

Pasos para la preparación de secciones en experimentos inmunohistoquímicos

El equipo de histología es esencial en los experimentos inmunohistoquímicos (IHC). Los 2 tipos comunes de métodos de seccionamiento empleados en los experimentos de IHC son el seccionamiento en parafina y el seccionamiento congelado. Los pasos del corte en parafina son: recolección de una muestra fresca, deshidratación (fijación, deshidratación, limpieza, infiltración de cera), inclusión en parafina, corte, tinción, montaje, observación al microscopio; este proceso implica el uso de equipo histológico básico, incluido el deshidratador, el compuesto OCT, la máquina de seccionamiento de parafina, la máquina de tinción, la máquina de montaje, el microscopio, etc. Los pasos del corte congelado son: recolección de una muestra fresca, inclusión congelada, corte en rodajas, tinción (se puede hacer manualmente), observación bajo el microscopio. Para este proceso de corte, el equipo histológico básico incluye un congelador instantáneo, una máquina de corte congelado y un microscopio.

Problemas comunes de los experimentos inmunohistoquímicos (IHC)

Los requisitos de los experimentos de IHC dependen de los tipos de muestras, antígenos y métodos de corte. Mientras tanto, la preparación de secciones de parafina en experimentos IHC implica pasos complicados. El pretratamiento de tejidos tiene requisitos elevados, ya que algunos antígenos pueden destruirse a mitad del proceso, lo que da como resultado el paso de recuperación de antígenos. El paso de recuperación se puede omitir en el corte por congelación, ya que hace un mejor trabajo para preservar la inmunocompetencia de los antígenos.

Si desea omitir el paso de recuperación de antígenos, en cuyo caso, el corte congelado se convertirá en el método de elección. Sin embargo, conducirá fácilmente a la formación de cristales de hielo, infligiendo un cierto nivel de daño en las estructuras celulares. Además, los cortes preparados por corte congelado son más gruesos que los preparados por corte en parafina, lo que repercute directamente en los resultados del corte. Si la cámara del criostato no proporciona suficiente refrigeración, entonces se utilizará un congelador instantáneo para respaldar el proceso de inclusión congelada. Al mismo tiempo, se debe considerar cómo adaptarse a las necesidades de los técnicos de laboratorio junior para garantizar que todo funcione sin problemas al comienzo del experimento. En este caso, el costo de los gastos operativos del laboratorio podría ser elevado.

Ventajas de usar RWD Cryostat para crioseccionar en experimentos inmunohistoquímicos (IHC)

Resuelva el problema de las rebanadas de tejido grueso

1. La salida de refrigeración del compresor admite la compensación de temperatura dos veces a la vez; El control de temperatura PID limita la fluctuación de la temperatura en la cámara dentro de un cierto rango y restaura automáticamente la temperatura a un nivel normal.

2. Los cojinetes de rodillos cruzados de primera calidad, el motor de muestreo de alta resolución de cinco fases, el husillo de alta densidad y la corredera de inyección hacen que el sistema de inyección sea de alta precisión.

3. Una vez que se cumplen los criterios anteriores, se puede lograr un resultado de sección ideal sin ajustar el grosor de la sección al máximo.

Reducir la presión causada por la formación de cristales de hielo

La formación de cristales de hielo se atribuye principalmente a la lenta tasa de congelación en la incrustación congelada. Por lo tanto, es necesario que el equipo sea capaz de hacer frente al requisito de congelación instantánea. El criostato RWD proporciona una etapa de congelación instantánea que puede alcanzar -42 ℃ como mínimo, mientras que el punto de congelación instantánea puede alcanzar incluso -60 ℃ a su temperatura más baja. Mientras tanto, la cámara y el cabezal de la muestra realizan la congelación por separado, lo que reduce la formación de cristales de hielo para garantizar la calidad de los resultados de la sección.

Bajo costo de gastos operativos

RWD Minux® FS800A posee 2 puntos de congelación flash semiconductores y 15 puntos de congelación regulares para atender las aplicaciones que involucran grandes volúmenes de tareas. Mientras tanto, la efectividad de la etapa de congelación está alineada con el estándar internacional, produciendo una función similar a la de la incrustación congelada. En este caso, el costo de la inclusión congelada será mucho menor sin el uso de un congelador flash.

Al mismo tiempo, proporciona un registro para ejecutar una retrospectiva de corte inmediata y efectiva para optimizar los criterios de corte y mejorar la calidad de los resultados de corte.

Seccionamiento automatizado

Al comienzo de los experimentos de IHC, algunos técnicos de laboratorio nuevos no cumplen los criterios de corte debido a que no están familiarizados con el uso del criostato y, por lo tanto, socavan la calidad de los resultados del corte. Teniendo todo esto en cuenta, proporciona una función de corte automatizado y permite a los usuarios preestablecer los criterios de corte. Con la función de corte automatizado, la calidad y la consistencia de los resultados de la sección están garantizadas. Mientras tanto, la máquina se puede adaptar mejor a los novatos en el laboratorio para garantizar un comienzo altamente efectivo de los experimentos.