¿Cómo mejorar la tasa de éxito de la construcción del modelo MCAO?

Este artículo le presenta el procedimiento y los puntos cruciales que lo ayudarán a mejorar su tasa de éxito.

(1) Fije la rata anestesiada en la mesa de operaciones en posición supina. Afeite el sitio quirúrgico y realice la desinfección. Use la tijera o bisturí oftálmico convencional para crear una incisión en la mitad del cuello, luego use una pinza para realizar una disección roma del tejido glandular y la fascia para exponer y separar CCA, ECA e ICA.

(2) Separar la ACI y la arteria pterigopalatina correspondiente. Utilice la sutura quirúrgica para ligar la arteria pterigopalatina con un nudo corredizo o sujete la arteria pterigopalatina directamente con una pinza vascular. Esta operación podría evitar la inserción de sutura en la arteria pterigopalatina, asegurando que la ACI sea la única rama abierta de la CCA.

(3) Separe el tronco de ECA y use la pluma de coagulación eléctrica para bloquear la rama de ECA. Ligar el extremo distal de ECA y cortarlo. Sujete la CCA y la ACI con abrazaderas arteriolares para evitar el sangrado antes de crear una incisión en forma de "V" en la ECA mediante el uso de una tijera oftálmica. Inserte la sutura pretratada con cabeza de silicona con cuidado a través de la ECA.

(4) Después de retirar la abrazadera arteriolar ICA, inserte la sutura en la MCA para llegar al final, a una profundidad de aproximadamente 17-18 mm (consulte el diagrama a continuación). Según el autor, la profundidad estimada empíricamente depende del peso del animal. Por ejemplo, para ratas entre 260 gy 280 g, la profundidad de inserción es de unos 17 mm; para ratas de más de 280 g, es de unos 18 mm. En resumen, una ligera resistencia constituye una señal, ya que indica que la sutura acaba de entrar en la arteria cerebral anterior intracraneal, bloqueando la apertura de la ACM.

(5) Use el sistema de imágenes de motas láser para monitorear el flujo sanguíneo de la corteza cerebral después de la cirugía. Las disminuciones del 70 % al 80 % en el flujo sanguíneo indican el establecimiento exitoso del modelo.

(6) Coser el tejido subcutáneo y la piel después de la ligadura y desinfección. Vuelva a colocar la rata en la jaula después de que se recupere de la anestesia.

(7) Solo tirando de la sutura para permitir que la cabeza de silicona regrese a la ECA, el flujo de sangre de la MCA se puede restaurar, ya que el flujo de sangre de la CCA se puede reperfundir en la MCA.

(8) El modelo del grupo de control sigue casi el mismo procedimiento, mientras que la única diferencia es que la sutura no se inserta después de la separación del vaso, y el tejido subcutáneo y la piel se pueden suturar después de la ligadura y desinfección.

El modelo de ratón MCAO se establece de la misma manera que el modelo de rata. En lugar de ligar la arteria pterigopalatina, el operador debe ajustar el ángulo con cuidado para evitar la arteria pterigopalatina al insertar la sutura. Seleccione una sutura adecuada según el peso del animal e insértela en la ICA (10 ± 0,5) mm para asegurarse de que la sutura esté justo en la arteria cerebral anterior intracraneal y bloquee la apertura de la MCA.

¿Cómo reducir la mortalidad en modelos animales de isquemia cerebral?

El presidente de la World Stroke Organisation y ex editor en jefe de Stroke afirma en la actualización de las recomendaciones preclínicas de la mesa redonda académica de la industria de la terapia del accidente cerebrovascular que:

"Cuando la severidad de la isquemia tiene que alcanzar un cierto umbral para su inclusión (por ejemplo, una disminución preespecificada en la perfusión detectada con flujometría láser Doppler, o el desarrollo de un deterioro neurológico de una severidad determinada), esto debe indicarse claramente. Por lo general, estos criterios debe aplicarse antes de la asignación a los grupos experimentales.Si se requiere un tamaño de lesión preespecificado para la inclusión, entonces debe detallarse, así como los criterios de exclusión correspondientes.

El accidente cerebrovascular isquémico focal en animales se induce típicamente por la oclusión de la arteria cerebral media. Sin embargo, los modelos de oclusión de la arteria cerebral media, incluidos los métodos de sutura y embólico, son imperfectos a la hora de provocar una reducción sostenida del flujo sanguíneo. Es posible que en algunas situaciones se produzca una oclusión, pero que se produzca una reperfusión espontánea, lo que da lugar a una variabilidad del tamaño del infarto. Los parámetros fisiológicos básicos como la presión arterial, la temperatura, los gases sanguíneos y la glucosa en sangre deben controlarse de forma rutinaria. La temperatura debe mantenerse dentro del rango fisiológico normal. Es importante monitorear el flujo sanguíneo cerebral usando imágenes de perfusión o flujo Doppler para documentar una oclusión sostenida adecuada y monitorear la reperfusión en modelos de isquemia temporal".[1]

Referencias

[1]Fisher M, et al. Accidente cerebrovascular, 2009