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Enfoques comunes para la centrifugación en el laboratorio
Este artículo le proporcionará enfoques comunes de la centrifugación en el Laboratorio
La centrifugación celular es un paso indispensable en los experimentos celulares habituales. Permite que las muestras adherentes se depositen completamente en el fondo del tubo y ayuda a confirmar la concentración celular. Las muestras centrifugadas pueden utilizarse para experimentos posteriores como cultivos celulares primarios, cultivos de pases celulares, secuenciación unicelular, etc.
Deben adoptarse diferentes enfoques para la separación centrífuga según el tipo de células y orgánulos.
Entonces, ¿cuáles son los enfoques comunes para la centrifugación celular?
01 Centrifugación diferencial
La centrifugación diferencial separa partículas de diferentes tamaños y formas en la mezcla heterogénea basándose en la velocidad de sedimentación de las partículas mientras aumenta gradualmente la fuerza centrífuga. Se utiliza normalmente para la separación de muestras de laboratorio, como mitocondrias de orgánulos, cloroplastos, proteínas y virus.
Pasos de la separación
Paso 1: Ajustar una velocidad relativamente baja para permitir que las partículas de alta densidad se depositen en el fondo del tubo, mientras que las partículas de tamaño medio-pequeño de la mezcla siguen suspendidas en el sobrenadante.
Paso 2: Recoger el sedimento. El sobrenadante resultante del paso 1 podría centrifugarse a mayor velocidad para separar las partículas de tamaño relativamente medio o pequeño, etc.
02 Centrifugación en gradiente de densidad
La centrifugación en gradiente de densidad, también conocida como centrifugación zonal, incluye la centrifugación zonal de velocidad y la centrifugación isodensidad.
1. Centrifugación zonal de velocidad
La centrifugación zonal se utiliza normalmente para separar células u orgánulos con densidades similares pero tamaños diferentes. Cargue primero el medio de gradiente de densidad, como sacarosa, glicerina, CsCl y Percoll, en el tubo de centrífuga. Hay que tener en cuenta que la densidad de las partículas de la muestra debe ser mayor que la densidad de cualquier punto de la columna de líquido del gradiente. Dado que las partículas separadas tienen diferentes velocidades de sedimentación en el líquido de gradiente, los diferentes componentes de la muestra mezclada pueden formar sus respectivas zonas en diferentes posiciones de la columna de líquido de gradiente, por lo que la separación se realiza durante la centrifugación.
2. Centrifugación isodensidad
La centrifugación isodensidad se aplica para separar partículas con densidades diferentes. Con suficiente fuerza centrífuga y tiempo, las células u orgánulos pueden asentarse o flotar en el medio con la misma densidad en un medio de gradiente continuo. La separación se consigue a medida que las células permanecen y alcanzan el equilibrio. Percoll se utiliza ampliamente como medio, mientras que CsCl, Cs2SO4 y triyodoformil-glucosamina también pueden lograr gradientes estables tras un centrifugado de larga duración.
La centrífuga refrigerada de sobremesa de alta velocidad RWD proporciona una centrifugación inteligente, adaptándose a varias aplicaciones desde micro a mediana producción con una velocidad de hasta 18.000 rpm (30.000×g). Ofrece una amplia selección de rotores y adaptadores (rotores de cubeta oscilante y rotores de ángulo fijo) para satisfacer las diferentes necesidades de los clientes. La capacidad del M1416R oscila entre 24 x 2mL y 4 x 400mL, y el rotor de placas también admite placas PCR y de pocillos profundos. Además, equipado con una pantalla táctil de 7 pulgadas, el M1416R ofrece un funcionamiento visual y un sistema de gestión de cuentas personalizado que garantiza un control eficaz y de calidad.
velocidad máxima: 18.000 rpm y volumen máximo: 400 ml*4
●9 rampas ACC/ 10 rampas DEC para satisfacer las diferentes necesidades de los clientes
●El rotor autoblocante con tapa de cierre rápido permite una instalación rápida en 3 segundos
●El sistema de gestión de cuentas personalizado proporciona programas organizados y un funcionamiento sencillo