Precauciones del uso de un micrótomo rotatorio durante el recorte, corte y montaje

El corte en parafina es la técnica más utilizada en histopatología.

Su protocolo puede ser complicado y cualquier omisión en cualquier paso puede afectar la calidad del corte. En el artículo anterior, discutimos sobre la solución de problemas y consejos comunes para la sección de tejido con micrótomos. En este número, analizaremos más de cerca las precauciones al operar el micrótomo de parafina desde el recorte, el corte hasta el montaje, y hablaremos sobre uno de los puntos más problemáticos: las secciones gruesas y delgadas alternas.

1 recorte

El recorte se realiza normalmente a un grosor de 20-30 µm.

Recomendamos recortar el tejido al grosor de 20-30 μm.

Para tejido más duro o tejido más pequeño, debe ser más delgado. Un recorte estándar se completa cuando se expone todo el tejido.

2 Seccionamiento

La cuchilla del micrótomo de calidad debe estar afilada y sin muescas, y debe reemplazarse con regularidad. Esto puede compensar las fallas en el proceso de pretratamiento.

Antes de seccionar: apriete la abrazadera de la cuchilla, el soporte de la cuchilla y el soporte del bloque de muestras, y recorte la rebanada hasta que el tejido quede completamente expuesto.

Durante el corte: el volante debe girarse a una velocidad uniforme. si es demasiado rápido, se producirá un grosor desigual de los cortes (saltos de rebanadas), desgastando el portacuchillas; si es demasiado lento, espesará los cortes. El grosor de corte generalmente se establece en 3 ~ 5 μm. Una sección estándar debe mantener el tejido integral y uniforme con un grosor uniforme. Las secciones de tejido incompletas pueden dar lugar a diagnósticos erróneos y omisiones.

Consejos: la dirección del tejido que se está incrustando. Las capas del tejido, la dirección de sus fibras, músculos, etc. deben ser paralelas al cuchillo. Las partes difíciles de cortar deben colocarse encima al incrustarlas, como la epidermis de la piel, la envoltura de la masa y la serosa del tracto gastrointestinal para minimizar la rotura de secciones de tejido. Después de cortar las rodajas requeridas, las rodajas se sacarán con pinzas y se colocarán en el baño de agua o se extenderán en la máquina de hornear.

Recordatorio:

Se debe comprobar que el micrótomo funcione correctamente antes de seccionar. Para tejidos duros como el tejido descalcificado, la médula ósea, los fibromas uterinos y el tejido calcificado, se debe utilizar el mismo borde de la hoja siempre que sea posible para reducir la posibilidad de dañar la hoja.

Al esparcir las secciones o al limpiar, el cepillo debe ir hacia arriba, ya que hacerlo hacia abajo puede causar fácilmente que la cuchilla corte los hilos del cepillo, lo que podría dañar la cuchilla.

3 Montaje

Poner los cortes al baño maría para aplanarlos y suavizarlos. Si las secciones aún se arrugan, agregue una solución de alcohol al agua, ya que reduce la tensión superficial y elimina las arrugas.

La rebanada de alta calidad se toma y se monta en el portaobjetos en su ubicación de 1/3 de uno de sus lados. El portaobjetos se etiquetará para su identificación. La temperatura general del agua para hacer flotar las rebanadas es de aproximadamente 40 ℃.

4 secciones gruesas y delgadas alternas

Se puede dar por sentado que si el espesor de la sección se establece en la máquina, las lonchas saldrán con el espesor deseado, y debe tener el espesor deseado, de lo contrario, la máquina debe ser inexacta. Sin embargo, hay varios otros factores que pueden causar la alternancia de secciones gruesas y delgadas.

Por ejemplo, el borde de la cuchilla no está afilado o la velocidad de corte no es uniforme: el corte lento da como resultado rebanadas más gruesas. Solo una cuchilla afilada con un recorrido de corte uniforme puede garantizar un corte de espesor uniforme.

Además, la temperatura ambiente también puede hacer que el bloque de cera se caliente, haciendo que las secciones sean más gruesas. En resumen, se deben analizar secciones delgadas y gruesas alternas de acuerdo con la situación real.

El micrótomo rotatorio RWD Minux® S710 puede resolver eficazmente el problema del grosor anormal y garantizar la calidad de la sección.

La característica única es combinar el corte manual y la configuración semiautomática, lo que garantiza la precisión del corte del micrótomo y cumple con los diversos hábitos de la mayoría de los operadores. Reduce la aparición de saltos de corte al seccionar tejidos duros y asegura la integridad y continuidad de las secciones. Además, cuenta con un mantenimiento de bajo costo.