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#Tendencias de productos
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Secuenciación de próxima generación(NGS)Ciencias de aplicación
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Aplicación de la ciencia
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La tecnología de secuenciación de alto rendimiento se utiliza ampliamente en las pruebas genéticas tumorales. Por un lado, la secuenciación genética puede identificar los genes mutados del cáncer y así determinar rápidamente los fármacos dirigidos; por otro lado, el tipo de muestra puede ser la sangre del paciente o incluso la saliva, lo que elimina la necesidad de las secciones patológicas tradicionales y reduce el daño al organismo del paciente durante el proceso de diagnóstico. Aquí presentaremos brevemente el proceso de NGS en la aplicación de pruebas genéticas de muestras tumorales.
1、Recepción de la muestra y control de calidad
Requisitos de la muestra de plasma: el volumen de recogida de sangre para el análisis de ctDNA debe ser de al menos 8mL y transportado al laboratorio central utilizando el tubo profesional de conservación de cfDNA BunnyTube almacenado a temperatura ambiente. Requisitos de la muestra de parafina del tumor (FFPE)
① tejido entero FFPE
② tamaño del tejido >0,5*0,5cm, cortar 5-10 láminas de tejido de parafina sin teñir, espesor 2-5μm
③ tamaño del tejido <0,5*0,5cm, se requieren 10-15 láminas, hechas en secciones o almacenadas directamente en un tubo EP de 1,5mL con contenido de células tumorales no inferior al 10% y tejido necrótico no superior al 70%
La caja de portaobjetos debe marcarse con el nombre, la fecha de nacimiento y la fecha de recogida, y almacenarse a temperatura ambiente.
2、Extracción y fragmentación del ADN de la muestra
Se utilizan diferentes kits de extracción para diferentes tipos de muestras para extraer el ADN necesario, y el ADN de grandes fragmentos moleculares se rompe en fragmentos de secuencias cortas de cierta longitud mediante fragmentación ultrasónica.
3、Preparación de la biblioteca y enriquecimiento de la biblioteca
Preparación de la biblioteca: Los conectores preparados se añaden a los fragmentos de ADN extraídos, y a continuación se utilizan los kits de selección y purificación de ADN para eliminar los fragmentos de ADN grandes y pequeños que no cumplen los requisitos, así como el exceso de conectores y otras impurezas. Enriquecimiento de la biblioteca: Los fragmentos de ADN diana se seleccionan mediante la adición de oligonucleótidos de bloqueo - hibridación molecular (adición de sondas que se capturan por hibridación con la diana) - adsorción de sondas (adición de perlas magnéticas y, por tanto, adsorción de sondas) - sedimentación magnética (captura de los fragmentos diana con imanes y elución de los fragmentos no diana).
4、Secuenciación
5、Análisis bioinformático y generación de informes
Una vez que los datos de la muestra están fuera de línea, el centro de cálculo analiza los datos utilizando diferentes métodos de análisis y computación de acuerdo con los requisitos de los diferentes programas experimentales. A continuación, se genera un informe específico basado en los resultados del análisis bioinformático para la interpretación de los médicos
Los productos de BunnyTeeth Technology están desarrollados y diseñados específicamente para la NGS y se utilizan ampliamente en las pruebas oncogénicas, el NIPT (cribado prenatal no invasivo) y la secuenciación del macrogenoma.