¿Por qué se usa qPCR para las pruebas de COVID-19 en todo el mundo?

¿Cuáles son sus ventajas técnicas?

Con la rutinización de las pruebas de COVID-19, qPCR, una tecnología de punta en diagnóstico molecular, se ha universalizado gradualmente. Esta tecnología tiene muchas ventajas técnicas sobre la PCR tradicional, lo que la convierte en el estándar de oro para las pruebas de COVID-19 en todo el mundo. ¿Cuáles son las ventajas de la qPCR que la hacen universalmente disponible y mantienen su excelente confiabilidad?

Ventajas de la qPCR

1. Bajo riesgo: la tapa solo se abre dos veces en todo el proceso, por lo que el riesgo de contaminación del laboratorio es pequeño;

2. Operación simple: la operación es más simple en comparación con los tediosos pasos de operación de mNGS, lo que facilita la promoción;

3. Rápido: el ADN amplificado se detecta mientras la reacción de qPCR está en curso, por lo que no es necesario detectarlo por separado (por ejemplo, en sefarosa) como en la PCR tradicional;

4. Alta eficiencia: qPCR se considera un método altamente eficiente y, junto con las estaciones de trabajo automatizadas de manipulación de líquidos, puede procesar una gran cantidad de muestras en poco tiempo;

5. Alta sensibilidad: qPCR es capaz de discriminar una diferencia de 2 veces en la cantidad de ADN objetivo y puede detectar tan solo unas pocas moléculas de ADN iniciales. QPCR solo necesita tan solo 1/1000 de la cantidad en comparación con PCR;

6. Amplio rango de cuantificación: puede cuantificar un amplio rango en varios órdenes de magnitud;

7. Reproducibilidad: se suele considerar altamente reproducible.

Aplicaciones de qPCR

Muchas personas pueden tener una comprensión básica de qPCR solo a través de las pruebas de COVID-19, pero su aplicación en realidad no puede limitarse a las pruebas de COVID-19. Debido a las obvias ventajas técnicas, qPCR tiene una amplia gama de aplicaciones. Dado que qPCR tiene una historia bastante larga, varios estudios han demostrado su confiabilidad y estabilidad. De manera similar, los fabricantes de cicladores de qPCR han desarrollado plataformas de soporte y los proveedores de equipos automatizados de manejo de líquidos han desarrollado soluciones automatizadas compatibles con qPCR.

Más comúnmente, qPCR se usa en diagnósticos moleculares, donde está reemplazando lentamente a los métodos tradicionales (imágenes microscópicas). Se utiliza para detectar, identificar y cuantificar los microorganismos (bacterias, virus y hongos) causantes de enfermedades. Con qPCR, se reduce el trabajo manual. Permite el procesamiento de una gran cantidad de muestras en poco tiempo (hasta 384 o incluso 1536 reacciones por corrida) y es un método insustituible en los laboratorios de diagnóstico. Cabe señalar, sin embargo, que el método solo detecta la presencia de ADN o ARN de microorganismos, no su viabilidad. Por lo tanto, las técnicas microbiológicas tradicionales todavía se necesitan a veces junto con la PCR. Además, otra área de aplicación muy importante de la qPCR son los estudios de expresión génica, que pueden ayudarnos a comprender varios campos de la biología, la microbiología, la medicina y otras ciencias de la vida.