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Fortalecimiento del flujo de trabajo analítico para el desarrollo del vector viral del VIAA

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Webinar en vivo el 23 de abril de 2020

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Los virus adeno-asociados recombinantes (rAAV) son una clase bien estudiada de vector viral que se está investigando intensamente en el desarrollo de terapias genéticas. A fin de desarrollar terapias eficientes de rAAV producidas mediante procesos de fabricación controlados y económicos, quedan por resolver múltiples problemas.

los rAAVs se producen típicamente en líneas celulares diseñadas en grandes biorreactores. Una vez producidas en el interior de la célula, las partículas de los rAAV se liberan por lisis, y luego se aíslan de la cosecha masiva mediante múltiples rondas de aislamiento; por ejemplo, mediante centrifugación de gradiente de densidad, cromatografía de intercambio iónico y filtración de flujo tangencial.

A lo largo del proceso de purificación posterior, se realizan múltiples ensayos para determinar los atributos analíticos clave para la determinación del rendimiento, la eficacia y la seguridad, así como para permitir la comprensión y el control del proceso. Estos parámetros son, por lo general, aunque no exclusivamente, los siguientes: recuento de cápsulas o partículas, recuento del genoma, porcentaje de partículas del genoma o porcentaje de partículas completas del VAR, caracterización del serotipo, tamaño de las partículas, nivel de agregación y presencia de proteínas y nucleótidos no deseados de las células huésped.

Los tres primeros parámetros (recuento de cápsulas/partículas, recuento del genoma, % de llenado) se miden comúnmente utilizando dos o más de los siguientes ensayos: qPCR, ELISA, AUC, HPLC-AEX, y/o TEM. Cada método tiene puntos fuertes y débiles intrínsecos, relacionados con el parámetro medido, el rendimiento deseado, la precisión y los requisitos de volumen de la muestra.

La Dispersión Dinámica de Luz Multiángulo (MADLS) es una novedosa técnica capaz de medir simultáneamente múltiples parámetros del rAAV, incluyendo la agregación, la carga de la cápside y la concentración de partículas. Es muy adecuada como ensayo complementario que puede utilizarse en los flujos de trabajo analíticos existentes para proporcionar una determinación rápida, sin etiquetas, no destructiva y de bajo volumen de la concentración total de partículas del rAAV.

En este seminario web, Jonathan Mehtala de Malvern Panalytical discutirá el principio de medición de MADLS y la aplicación de este novedoso método a la caracterización de muestras de modelos de rAAV, así como a las terapias de rAAV en desarrollo. Se discutirán los datos resultantes sobre la concentración viral y el tamaño de las partículas del rAAV, junto con los efectos de las propiedades de las muestras, como el índice de refracción del material y la viscosidad. Kirsty McManus, de Allergan, seguirá con ejemplos reales de casos de análisis de múltiples serotipos de rAAV de muestras de sustancias de drogas y procesos de desarrollo.

Por favor, únase a nosotros el 23 de abril para aprender más sobre el mundo de la terapia genética y las técnicas de caracterización analítica diseñadas para ofrecer resultados robustos, fiables y rápidos.

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