Los resultados de la MMR son incoherentes con el estado MSI, ¿cuáles son las razones?

Los resultados de la MMR son incoherentes con el estado MSI, ¿cuáles son las razones?

I. ¿Qué es la triple vírica?

En la replicación del ADN se producen diversos errores debidos a factores externos o internos, como roturas de una o dos cadenas, desajustes de bases, daños por entrecruzamiento, etc. Afortunadamente, el cuerpo humano dispone de un sistema de autorreparación y regulación de los daños en el ADN que permite mantener el funcionamiento normal del organismo. El sistema de reparación de desajustes (MMR) puede reparar los errores de desajuste de bases que se producen durante la replicación del ADN, manteniendo así la estabilidad genómica.

Los miembros de la familia del sistema de reparación de desajustes incluyen proteínas como MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2. La familia de proteínas de reparación de errores de emparejamiento consta de dos complejos con funciones de reparación de errores de emparejamiento, siendo MLH1 y MLH2 las principales proteínas funcionales dentro de estos complejos.

La deficiencia del sistema de reparación de emparejamientos erróneos (dMMR, deficient mismatch repair) se debe a anomalías en la función de estas proteínas. La expresión de las cuatro proteínas MMR mencionadas puede detectarse normalmente mediante inmunohistoquímica (IHC). La ausencia de cualquiera de las proteínas MMR indica dMMR, mientras que la expresión normal de las cuatro proteínas indica pMMR.

II. ¿Qué es la MSI?

Los microsatélites (MS) son secuencias cortas y repetitivas de ADN, comúnmente compuestas por repeticiones en tándem de doble base CA/GA/GT o de una sola base A/T, normalmente con 1-6 pares de bases como unidad de repetición.

Anteriormente, también mencionamos que el ADN puede sufrir algunos errores durante el proceso de replicación. Teniendo en cuenta que los microsatélites, estas secuencias repetidas en tándem, hacen que el ADN sea más propenso a la "fatiga" durante la autorreplicación, la probabilidad de que se produzcan errores es aún mayor.

Si, en este punto, el sistema de reparación de errores de emparejamiento también funciona mal, los errores de replicación introducidos por los microsatélites no pueden corregirse rápidamente y siguen acumulándose. Esto provoca cambios en la longitud o la composición de bases de las secuencias de microsatélites. Este fenómeno se conoce como inestabilidad de microsatélites (MSI).

estabilidad de microsatélites e inestabilidad de microsatélites

III. Cómo detectar y evaluar la inestabilidad de microsatélites (MSI) en la evaluación del estado de la MSI?

01. Método multiplex de PCR fluorescente por electroforesis capilar

Este método está reconocido actualmente como el "patrón oro" para la detección de MSI. Normalmente consiste en analizar los sitios MSI tanto en tejidos normales como tumorales y, a continuación, determinar el estado MSI de la muestra tumoral comparando el número de puntos de inestabilidad de microsatélites. El consenso de expertos nacionales recomienda el uso de una combinación de 5 a 7 sitios de microsatélites (BAT-25, BAT-26, NR-21, NR-22, NR-24, NR-27, MONO-27) para la detección de MSI. La interpretación de los resultados MSI suele ser la siguiente: 2 o más marcadores que muestran inestabilidad indican MSI-H; 1 marcador que muestra inestabilidad indica MSI-L; y todos los sitios estables indican MSS.

02. Método de secuenciación de alto rendimiento (NGS)

Con el gran desarrollo de la tecnología de secuenciación de alto rendimiento y la creciente riqueza de las aplicaciones clínicas, la NGS tiene ventajas únicas en la detección del estado MSI. Puede evaluar simultáneamente un mayor número de secuencias de microsatélites y proporcionar información adicional valiosa de otras pruebas.

IV. Análisis comparativo de diversas metodologías para la evaluación del estado MSI

consenso de expertos chinos sobre la detección de la inestabilidad de microsatélites en el cáncer colorrectal y otros tumores sólidos relacionados

V. dMMR no es igual a MSI-HLa relación entre MSI y MMR es estrecha; hasta cierto punto, dMMR ≈ MSI-H, y pMMR ≈ MSS + MSI-L. Sin embargo, debido a las diferencias en los sujetos de detección y las plataformas tecnológicas de detección para MMR y MSI, existe un problema de conformidad incompleta.

VI. Inconsistencias entre la detección de la proteína MMR y el estado MSI y razones correspondientes

01

dMMR, pero MSS

Pérdida de proteína MMR (proteína MSH6), pero su función está compensada por (proteína MSH3), y aún puede reparar genes mal emparejados. Sin embargo, como la proteína MSH3 no se incluye en la detección por IHC, el resultado sigue siendo MSS.

02

pMMR, pero MSI-H

El gen MMR sufre una mutación sin sentido, y la función de la proteína MMR puede ser anormal, pero su estructura antigénica puede no estar afectada. En este caso, la IHC detecta que la proteína MMR se expresa normalmente, es decir, pMMR, pero su función de reparación de emparejamientos erróneos es anormal, lo que da lugar a resultados de detección de MSI-H.

MSI-H causada por mutaciones en genes distintos de los genes MMR (como POLE/D).

VII. ¿Cómo tratar las incoherencias entre la detección de la proteína MMR y el estado de MSI?

El "Chinese Expert Consensus on Microsatellite Instability Detection in Colorectal Cancer and Other Related Solid Tumors" (Consenso de expertos chinos sobre la detección de la inestabilidad de microsatélites en el cáncer colorrectal y otros tumores sólidos relacionados) sugiere que si un paciente se somete tanto a la expresión de la proteína IHC-MMR como al análisis de ADN (PCR o NGS) para comprobar el estado MSI, y los resultados son inconsistentes, se puede considerar el tercer método (NGS o PCR) para la verificación (recomendado por algunos expertos).

El producto MSI de SpaceGen puede probar simultáneamente 34 loci MSI con una alta tasa de tolerancia a fallos, proporcionando un fuerte apoyo para la evaluación de la eficacia de la inmunoterapia en tumores sólidos comunes.

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