Estudio de detección génica de muestras de hidrotórax, ascitis y sobrenadante

El derrame pleural maligno (EMP), también conocido como derrame pleural, es un derrame pleural causado por la metástasis de tumores malignos que se originan en la pleura u otros tumores malignos que afectan a la pleura.

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El derrame pleural maligno (EMP), también conocido como derrame pleural, es un derrame pleural causado por la metástasis de tumores malignos que se originan en la pleura u otros tumores malignos que afectan a la pleura. Casi todos los tumores malignos pueden invadir la pleura y producir DPM, que es más común en cáncer de pulmón, cáncer de mama, cáncer gastrointestinal y otros cánceres[1].

Las células malignas en derrame pleural y/o tejido pleural son el "estándar de oro" para el diagnóstico de MPE. El estudio informó que la sensibilidad de la citología del derrame pleural en el diagnóstico de DPM fue del 60,0 % (40,0 %~87,0 %)[2,3]. Su rendimiento diagnóstico depende de la localización del tumor. Si se encuentra en la superficie de las células mesoteliales pleurales, las células malignas se desprenden fácilmente y entran en el derrame pleural. Solo unas pocas células malignas caerán al espacio pleural cuando estén ubicadas en o debajo de la capa serosa. La cantidad mínima de líquido requerida para el examen citopatológico sigue siendo controvertida. Generalmente se considera que 20~50 ml son suficientes. Sin embargo, se informa en la literatura que la cantidad de líquido enviado para examen> 75 ml puede mejorar la tasa de diagnóstico de MPE [4].

Estudio de muestras celulares de líquido pleural en detección de genes

1.En 2019, el estudio[5]del Hospital Oncológico de la Universidad de Pekín recolectó retrospectivamente 295 muestras de MPE de pacientes con adenocarcinoma de pulmón.92 pacientes tenían muestras de tejido y plasma coincidentes, y 248 pacientes tenían muestras de plasma. La concordancia entre la detección de células de derrame pleural maligno y la detección de tejido fue del 87,1%. La sensibilidad y la especificidad de la detección de la mutación del EGFR de las células de derrame pleural fueron del 71,4 % y del 96,5 %, lo que podría reflejar mejor la mutación del EGFR del tejido tumoral y guiar de forma eficaz el tratamiento específico de los pacientes.

Comparación de los resultados de detección de mutaciones de EGFR entre MPE y tejido

2. El Consenso de expertos sobre la detección de la mutación del gen EGFR T790M en pacientes chinos con cáncer de pulmón de células no pequeñas[6] señala que cuando no se pueden obtener tejidos, se pueden considerar otras muestras, como muestras de citología tumoral o muestras de plasma para EGFR T790M detección (Categoría 2A).

Detección de genes de muestras de sobrenadante de derrame pleural

1.Un estudio[7]incluyó a 63 pacientes con cáncer de pulmón metastásico (n=30, cohorte 1) o tejido tumoral no compatible (n=33, cohorte 2). Se recolectaron muestras de PE y plasma de cada paciente al mismo tiempo. El sobrenadante y el sedimento celular de PE se trataron respectivamente para extraer cfDNA (PE cfDNA) y sedimento de ADN (sDNA). Los resultados mostraron que el 98,4 % (62/63) de las muestras de cfDNA de PE en todos los pacientes tenían cambios somáticos detectables, mientras que el 90,5 % (57/63) de las muestras de cfDNA de PE y el 87 % (55/63) de las de cfDNA en plasma. Es decir, el contenido de ctDNA en el sobrenadante del derrame pleural es mucho mayor que el de las células del sedimento del derrame pleural, y tiene una mayor tasa de detección de mutaciones y una mayor abundancia de detección de mutaciones: sobrenadante del derrame pleural (98,4%)>células del derrame pleural ( 90,5%).

Detección de variaciones de todos los pacientes

2. Otro estudio[8] utilizó el método de secuenciación de segunda generación (NGS) para detectar la mutación del gen en el líquido pleural sobrenadante de pacientes con adenocarcinoma de pulmón (n=150). Las 150 muestras obtuvieron suficiente ADN y 104 (90 %) de Se analizaron con éxito 116 muestras para NGS. Se detectaron mutaciones somáticas en el 82% de las muestras y mutaciones clínicamente relevantes en el 50% de los pacientes. La comparación de mutaciones impulsoras operables detectadas en muestras de plasma y sobrenadante mostró una consistencia del 84 %.

Conclusión: La detección de genes moleculares del sobrenadante de derrame pleural hace conveniente la detección de genes de rutina. Es muy rico en ADN tumoral fresco, que puede proporcionar muestras valiosas para la detección de genes de cáncer de pulmón. Especialmente para pacientes con tejido tumoral insuficiente, puede reducir la tasa de fallas en la detección de genes, acortar el ciclo de detección y evitar biopsias repetidas.

Superposición de mutaciones impulsoras operables clínicamente relevantes detectadas entre las muestras de sobrenadante de FNA y la detección de biopsia líquida de cfDNA en plasma correspondiente

Envío de muestra para inspección

Para el envío de muestras, el derrame pleural se almacena en un tubo de centrífuga de 50 ml, 30-50 ml para el proyecto tumoral multigénico, 15-20 ml para el proyecto EGFR y se transporta a baja temperatura.

En la recomendación 6 del Consenso de expertos chinos[9] sobre el diagnóstico de derrame pleural, se señala que para el cáncer de pulmón de células no pequeñas con MPE, se pueden seleccionar muestras de tejido tumoral o muestras de masa celular del sedimento de derrame pleural para la detección.

Aunque las muestras de hidrotórax tienen un rendimiento de detección muy consistente con las muestras de tejido en la detección de genes tumorales. Sin embargo, es innegable que la tasa de detección de las muestras quirúrgicas o de punción en el sitio del tumor es mejor que la de las células de derrame pleural o las muestras de sobrenadante. Por lo tanto, en En cuanto a la selección de muestras, el consenso de expertos chinos sobre la aplicación clínica de la tecnología de secuenciación de segunda generación en NSCLC todavía recomienda que las pruebas genéticas de los pacientes con tumores sean la primera opción para las pruebas de tejidos. En el caso de muestras de tejido insuficientes o tejidos inaccesibles, se puede seleccionar la biopsia líquida como medio complementario[10].

Puntos clave del consenso de expertos chinos sobre la aplicación clínica de la tecnología de secuenciación de segunda generación en NSCLC

Para los proyectos relacionados con el cáncer de pulmón biológico de Feishuo, como el kit de detección de mutaciones del gen EGFR/KRAS/BRAF/HER2/ALK/ROS1 humano (GXZZ 20203400094) y el kit de detección de mutaciones del gen EGFR humano (GXZZ 20193400366), las muestras de células de precipitación y extracción de efusión pleural pueden utilizarse para la detección. Para más detalles, póngase en contacto para discutir asuntos de cooperación.

Referencia:

[1]Medicina (Kaunas). 15 de agosto de 2019; 55 (8): 490.

[2]DOI: 10.1136/thx.2010.136978.

[3]Can Respir J, 2020, 2020: 2950751.

[4] Cancer Cytopathol, 2014, 122(9): 657‐665.

[5]Cáncer de pulmón. 2019 septiembre; 135: 116-122.

[6]Consenso de expertos sobre la detección de la mutación del gen EGFR T790M en pacientes chinos con cáncer de pulmón de células no pequeñas

[7]Theranostics 2019; 9(19): 5532-5541.

[8]Annals of Oncology 30: 963–969, 2019

[9]Consenso de expertos chinos sobre el diagnóstico de derrame pleural

[10]Consenso de expertos chinos sobre la aplicación clínica de la tecnología de secuenciación de segunda generación en NSCLC (versión 2020)